LC-MS/MS를 이용한 저분자 어류 콜라겐 펩타이드의 중요 바이오 마커 식별 분석방법 개발
- Alternative Title
- Identifying important biomarkers in low-molecular weight fish collagen peptides through LC-MS/MS to differentiate the origins of collagen
- Abstract
- 콜라겐은 포유류에 가장 큰 비율을 차지하는 단백질군이다. 따라서 시중에서 대부분 판매되는 식용 콜라겐은 주로 포유류인 소나 돼지를 주 원료로 사용하고 있다. 하지만 질병 전파 및 종교적 문제로 인해 최근에는 포유류 콜라겐의 대체제인 해양 콜라겐에 관심이 쏠리고 있다. 해양 콜라겐 중에서도 어류 콜라겐은 비교적 포유류 콜라겐과 생체 적합성이 높아 다른 해양 생물들에 비해 가장 많이 활용되고 있다. 따라서 콜라겐의 품질관리와 제품인증을 위해 다양한 어종 콜라겐의 특성을 식별할 수 있는 분석 프로토콜이 필요하다. ELISA와 FTIR은 콜라겐 단백질을 분석하는데 기존에 쓰이던 실험방식들이다. 그러나 콜라겐의 경우, 낮은 반응성, 결과의 불일치, 그리고 위양성/위음성을 띄는 결과 값들에 의해 ELISA 와 FTIR의 분석방법은 다소 신빙성이 떨어진다. 그러므로 본 논문에서는 EC 분석을 사용해 콜라겐 펩타이드의 분자량 크기를 확인하기고, 콜라겐 어종 분석을 위해 선택적 bottom-up LC-MS analysis 방법을 개발했다. 그 결과 총 5종의 어류 콜라겐에 해당하는 각각의 펩타이드 바이오 마커를 식별해냈다.
- Author(s)
- 우민영
- Issued Date
- 2024
- Awarded Date
- 2024-02
- Type
- Dissertation
- URI
- https://repository.sungshin.ac.kr/handle/2025.oak/1654
http://dcollection.sungshin.ac.kr/common/orgView/000000014981
- Alternative Author(s)
- Minyoung Woo
- Affiliation
- 성신여자대학교 일반대학원
- Department
- 일반대학원 미래응용과학학과
- Advisor
- 고병준
- Table Of Contents
- Ⅰ. 서론 1
Ⅱ 실험 재료 및 방법 7
1. Chemical and Reagents 7
2. HPLC & LC-MS Equipment 9
3. Preparation of QC and calibration standards 9
4. Sample Preparation 10
1) Tryptic digestion sample 10
① 단백질 추출 및 펩타이드화 10
② 정제 과정(SPE) 11
2) Undigested sample 11
5. HPLC Experiment 12
6. LC-MS/MS Experiment 12
7. Database Search 15
Ⅲ. 결과 및 고찰 17
1. SEC-HPLC 분자량 분석 17
2. LC-MS/MS 특이서열 분석 19
1) 전처리 방법 연구 19
2) 컬럼 선택 27
3) 이동상 선택 32
4) 어종의 특이서열 36
Ⅳ. 결론 43
- Degree
- Master
- Publisher
- 성신여자대학교 일반대학원
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- 미래응용과학학과 > 학위논문
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